Tinción de microorganismos

Tinción gram:

Bienvenidos nuevamente al vlog. Estas últimas semanas en mi clase de microbiología han sido realmente emocionantes porque hemos estado profundizando en uno de los métodos más esenciales en el diagnóstico microbiológico: la tinción de Gram. Este proceso es fundamental para identificar bacterias y comprender sus características básicas. Desde la preparación de las muestras hasta la observación bajo el microscopio, cada paso aporta información valiosa. En este post, quiero compartir todo lo que he aprendido sobre la tinción de Gram, cómo funciona y por qué es tan importante en el estudio de los microorganismos. ¡Acompáñenme en este viaje al mundo microscópico!

El procedimiento de tinción más ampliamente usado en bacteriología, Nos permite dividir a las bacterias en dos grandes grupos taxonómicos: Gram positivas y Gram negativas, según sea su comportamiento frente a la tinción. Se cree que la diferencia en la coloración que adquieren los dos grupos de bacterias se debe a la distinta composición química de la pared celular. Las bacterias Gram positivas tienen una gruesa capa de mureína o peptidoglicano (de 20 a 80 nm de espesor) en su pared, mientras que las bacterias Gram negativas tienen una capa de peptidoglicano (2 nm) más fina y una capa más externa de lipopolisacáridos, lipoproteínas y lípidos.

La tinción requiere cuatro soluciones un colorante o tinte básico, un mordiente (sustancia que incrementa la afinidad entre la célula y el tinte), un decolorante (elimina el tinte de una célula teñida) y un segundo tinte o colorante de contraste (tinte de color diferente al inicial). Tras la tinción con el primer colorante (Cristal violeta) se efectúa una decoloración con etanol que arrastrará al colorante sólo en las Gram negativas, mientras que en las Gram positivas el colorante queda retenido y las células permanecerán azules. Las células Gram negativas se teñirán después con el colorante de contraste (safranina) para que puedan observarse. 

Procedimiento:

- Con un asa de siembra tome una colonia y extiéndala en un porta con el fin de preparar un frotis bacteriano y fije la preparación

- Tiña con cristal violeta durante 30 segundos.

- Tirar el exceso de colorante

- Añadir lugol, esperar un minuto

- Decolorar con etanol al 95%, 20 segundos.

- Lavar con agua.

- Añadir el colorante de contraste, safranina, esperar 1 minuto.

- Lavar con agua.

- Observar al microscopio (x40, x100).